Modern medicin har specifika diagnostiska metoder som gör det möjligt att fastställa etiologin för sjukdomar hos människor baserat på definitionen av patogenen, genetiskt främmande ämnen som stimulerar immunsvaret, nukleinsyror, samt allergiska och immunförändringar som uppstår på grund av hans handlingar. Idag används RIA i stor utsträckning inom immunologi och virologi, det vill säga radioimmunoanalys, målen för inställningen, komponenterna, kursen, vars redovisning, vi kommer att överväga i den här artikeln. Denna analys kan detektera antigener som ett resultat av deras interaktion med antikroppar.
Definition
RIA är en metod för att diagnostisera biologiskt aktiva ämnen i vätskor, som bygger på antigeners reaktion med antikroppar vid användning av radionuklidmärkta analoga ämnen som har speciella bindningssystem. Efter deras interaktionett immunkomplex bildas som separeras och dess radioaktivitet studeras. Det är känt att radioimmunoanalys utförs med standardreagenssatser.
Varje reagens kan bestämma koncentrationen av en specifik substans. Den biologiska vätskan som tas från en person blandas med ett reagens, efter inkubationsperioden separeras de fria och bundna radioaktiva ämnena, sedan utförs radiometri och resultaten beräknas. En isotop av jod används för att märka ämnen. Den markeras och läggs till i ett visst belopp.
Application
Radioimmunanalys har en bred tillämpning inom medicin och mikrobiologi. Det används för att diagnostisera hjärt- och kärlsjukdomar, sjukdomar i endokrina och andra kroppssystem. RIA används också ofta för att identifiera orsaken till infertilitet, patologin för fosterutveckling. Inom onkologi utförs denna analys för att bestämma markörerna för neoplasmer för att kunna övervaka behandlingens effektivitet. Inom immunologi används RIA för att studera förekomsten av immunglobuliner, enzymer, proteiner och så vidare i blodet. Idag låter denna analys dig upptäcka koncentrationen av olika hormoner upp till en miljondel av ett gram. Således används radioimmun blodanalys i stor utsträckning inom kardiologi, onkologi, endokrinologi, gynekologi och virologi.
RIA-metoder
Det är vanligt att skilja mellan flera analysmetoder, beroende på artenreaktioner:
- Den icke-konkurrerande metoden kännetecknas av sådana reaktionskomponenter som standard- och detekterbara antigener, buffertlösning, isotopmärkta antikroppar, vissa antikroppar som binder till sorbenten. Ett antigen läggs till de antikroppar som ska testas. Efter inkubation uppstår antigen-antikroppskomplex, sorbenten tvättas, märkta antikroppar tillsätts som binder till antigenet i komplexet. Radioaktiviteten beror på koncentrationen av antigenet som testas.
- Kompetitiv radioimmunoanalys drivs av antigenkonkurrens. Här finns sådana komponenter i reaktionen som kontroll- och bestämda antigener, en buffertlösning, vissa antikroppar som binder till sorbenten, samt ett isotopmärkt antigen. Diagnos börjar med införandet av antigenet som undersöks. Ett antigen-antikroppskomplex bildas på sorbenten. Sedan tvättas sorbenten och det märkta antigenet injiceras. På så sätt binder den till antikroppen. Med hjälp av räknare mäts reaktionen och mängden radioaktivitet. Det kommer att vara i omvänd proportion till mängden antigen i provet.
- Den indirekta metoden är den vanligaste. I detta fall har radioimmunoanalysen av reaktionskomponenten såsom kontroll- och testserum, antigener eller antikroppar som är bundna på sorbenten, antikroppar märkta med isotoper, buffertlösningar. Antikroppar eller antigener som diagnostiseras reagerar med antigener eller antikroppar som är bundna till sorbenten. Sedan tas inkubatet bort, märkta antikroppar injiceras som binder tillantigen-antikroppskomplex.
Analysmetodik
Så, radioimmunoanalys utförs med speciella reagenser. Uppsättningarna är standard, så eventuella fel eller överträdelser är inte tillåtna. Diagnostiska resultat är tillförlitliga. Analysen utförs på morgonen, för detta tar de venöst blod från en person. I laboratoriet separeras serum från blodet som ska användas för RIA. Detta serum blandas med reagens. Den resulterande blandningen inkuberas vid en given temperatur i en termostat.
Fri och bundna isotoper separeras i den resulterande blandningen. Därefter granskas det mottagna materialet och resultatet beräknas. Radioimmunoanalysmekanismen har flera alternativ. Tekniken som beskrivs ovan är en vätskefas RIA, eftersom alla komponenter är i flytande tillstånd. Det finns RIA och fast-fas, där antikroppar placeras i en bärare som inte löser sig i vätska.
Tillgänglighet för diagnostik
Användningen av denna diagnostiska metod inom medicinen blir mer och mer populär för varje år. På senare tid har radioimmunoassay blivit en standard diagnostisk metod som kan ordineras av en läkare när en slutlig diagnos ställs. Under lång tid utfördes denna typ av analys endast i laboratorier, idag har det blivit en vanlig forskningsmetod. Men RIA kräver användning av dyr utrustning (gammaräknare), och reagenssatser har en kort livslängd. Allt detta är den största nackdelen med en sådan analys, som bestämmer dessdyr kostnad.
Dessutom har RIA nyligen börjat ersätta mer moderna forskningsmetoder som inte kräver interaktion med isotoper. Dessa inkluderar enzymimmunanalys. Således är RIA önskvärt på många kliniker. Den har länge använts i stora städer och diagnostiska centra, men på vanliga sjukhus i små städer används denna analys praktiskt taget inte på grund av dess höga kostnad.
Dignity of RIA
Radioimmunoanalys har många fördelar. Det är ganska specifikt och har hög känslighet, vilket gör det möjligt att bestämma närvaron av biologiskt aktiva ämnen i otroligt små mängder. Denna analys utförs mycket enkelt, en person behöver bara donera venöst blod. Testresultaten är 100 % korrekta och klara redan nästa dag. RIA kan också enkelt automatiseras. Den här analysen låter dig alltså identifiera proteiner som är avfallsprodukter från smittsamma bakterier, vilket indikerar förekomsten av infektion i kroppen.
Diagnos in Virology
Den mest lovande RIA är för virologi, eftersom den gör att du snabbt kan identifiera virala patogener. Detta beror på att förekomsten av olika infektioner de senaste åren har ökat, som sprider sig i hög hastighet och orsakar dödlighet bland människor. Detta gäller särskilt för länder som inte har en highsocial och ekonomisk utveckling (länderna i Fjärran Östern), radioimmunoanalys är helt enkelt oumbärlig här. Mikrobiologi använder också denna diagnostiska metod för att upptäcka infektionssjukdomar orsakade av patogena bakterier. Till exempel används RIA flitigt för att upptäcka tyfoidfeber. Under de första dagarna av sjukdomen, före utnämningen av behandling, är det nödvändigt att genomföra en studie av avföring och kräks. De diagnostiska resultaten kommer dock att erhållas efter lång tid. Här kommer RIA till undsättning, analysen låter dig identifiera orsaken till sjukdomen på kort tid. En person donerar blod, nästa dag är resultaten av studien klara. Denna analys hjälper till att ställa en korrekt diagnos.
Resultat
Radioimmunoassay är för närvarande en av de mest känsliga diagnostiska metoderna. Den används för att analysera alla substanser mot vilka antikroppar kan erhållas. Denna metod gör det möjligt att ta många prover i den minsta volymen av den undersökta vätskan, samt att registrera resultaten på kortast möjliga tid, eftersom det kan vara helt automatiserat. Denna analys utvecklades på 1950-talet av Solomon Burson. Trettio år senare blev det utbrett. Hittills finns det inget hundraprocentigt alternativ till RIA, eftersom analysen har en hög känslighet. RIA används inom olika grenar av medicinen, såväl som inom mikrobiologi och virologi.
Äntligen
Användningen av metoden inom virologi är mycket relevant idag, eftersom den gerförmågan att undersöka spridning av infektioner, ställa en korrekt diagnos och ordinera specifik behandling. Detta problem är särskilt relevant för länder som har en låg nivå av ekonomi och social utveckling. Denna analys låter dig också upptäcka mängden hormoner och enzymer i människokroppen. För att få tillförlitliga resultat behöver forskaren bara donera blod för analys. Medicinen står inte stilla, tillsammans med radioimmunoanalyser dyker nya forskningsmetoder upp, men RIA fortsätter att vara en av de ledande inom medicinsk diagnostik.
