Den här artikeln kommer att ägnas åt fenomenet nederbördsreaktion. Här kommer vi att överväga egenskaperna i formuleringen av detta fenomen, fenomenet diffusion, allmänna egenskaper, roll i mänskligt liv och mycket mer.
Introduktion till fenomenet
Nedfällning är ett fenomen av serologisk typ, under vilket lösliga antigener interagerar med antikroppar och som ett resultat av detta observeras utfällning - en fällning.
Det allmänna kännetecknet för utfällningsreaktionen är en form av koordinerad påverkan av antigen och antikropp. Dessa typer av interaktioner gör det möjligt att fastställa förekomsten av okända antigener i testsubstansen genom att tillsätta kända antikroppar och antigener. Utfällningsprocessen utan närvaro av s alter kommer att fortskrida sämre, och det bästa optimum ligger inom intervallet 7,0-7,4 pH.
Beståndsdelar i en reaktion
Det finns tre huvudelement bland komponenterna i utfällningsreaktionen:
- Ett antigen med molekylär natur. Det är i det fina typtillståndet, med andra ord, detlöslig. Ett sådant antigen kallas också en precipitogen, som är ett lysat eller vävnadsextrakt, etc. En precipitogen har en karakteristisk skillnad från en agglutinogen, som ligger i storleken på partiklarna som den består av. Agglutinogen har en inneboende cellstorlek och precipitogener står i proportion till molekylens storlek. Antigenlösningen kännetecknas av transparens.
- En antikropp som finns i humant blodserum, såväl som i immundiagnostiskt serum, som innehåller de studerade antikropparna.
- Elektrolyter är natriumkloridlösningar som är isotoniska.
Precipitogenproduktion
Det är omöjligt att sätta upp en utfällningsreaktion utan en utfällning, som erhålls genom att mala material och extrahera proteinantigener från dem. Extraktion sker genom kokning eller andra metoder.
Lysater, samt vävnads- och organextrakt, blodserum, olika typer av filtrat baserade på mikrobiella buljongkulturer, samt s altextrakt av mikroorganismer och autolysatämnen, är en slående exempel på utfällningsgener.
Inställning i nederbörd
Låt oss nu överväga metoden för att ställa in utfällningsreaktionen.
En ringfällningsreaktion utförs, som sker i speciellt förberedda provrör. Serum införs i diskens hålighet och häller det över väggen med hjälp av en pipettpip. Därefter läggs lämplig mängd utfällning försiktigt ovanpå, och sedan förs röret till ett vertik alt läge från ett horisontellt. Att ställa in och ta hänsyn till fällningsreaktionen är en mycket noggrann operation. Resultatet registreras efter uppkomsten av en vit ring på gränsen mellan antigenet och antikroppen. Om de reagerande elementen i reaktionen överensstämmer med varandra, så binder de, men detta blir märkbart efter en lång tidsperiod av deras interaktion
Utfällningsreaktionen utförs också i en petriskål eller på ett glas objektglas, där agargel överförs, applicera det i ett litet lager. Efter att det härdar i gelén skärs ett litet antal brunnar ut i vilka antigener och antikroppar kommer att placeras. Det finns två sätt att utföra denna åtgärd: metoden för radiell immundiffusion och dubbel immundiffusion.
Allmän information
Mekaniken i arbetet med nederbörd liknar agglutinationsanordningen. Under påverkan av serum av immuntyp minskar antigenet, som redan har ingått i reaktionen, dess spridningsgrad. En viktig förutsättning är transparensen av både serum och antigen.
Du kan förbättra registreringen av reaktionen om du lägger antigener på antikroppar. Som ett resultat kan uppkomsten av fällningar i form av en ring observeras. Detta fenomen kallas ringfällning och utförs i speciella rör med en diameter på 2,5 till 3,5 mm. Ett av de vanligaste exemplen på en utfällningsreaktion är diagnosen mjältbrand.
Nedbörd gör det möjligt att bestämma graden av toxicitet hos en difterikultur i agar.
Under den övervägda reaktionenutfällning av antigena komplex och antikroppar sker. Nederbörd är ett immunologiskt fenomen som gör att du kan bestämma mängden antikroppar i blodserumet hos en sjuk eller vaccinerad person och djur.
Titreringskonsekvens
Det är viktigt att veta att data som erhålls genom titrering av metoden ovan inte är kvantifierbara. För att skapa och analysera en kvantitativ bedömning av det inneslutna antalet antikroppar utvecklades en speciell reaktionsteknik av M. Heidelberger och E. Kabat, som bygger på sökning och identifiering av ekvivalenszonen. Att blanda åldersantalet av antigener med en konstant volym av antiserum leder till en ökning av den initi alt bildade fällningen, och sedan minskar den igen på grund av en ökning av förmågan att lösa upp antigenkomplexen. Genom att bestämma mängden antikroppar i supernatanterna som finns i varje rör kan du upptäcka att ett visst antal skålar med antikroppar kommer att sakna vätska. Här kommer, i jämförelse med andra provrör, den största fällningen att bildas. På grund av detta och subtraktion av den antigena proteinfällningen från det totala värdet av proteiner, är det möjligt att erhålla det exakta värdet av de antikroppar som finns i volymen av det specifika serum som studeras. Vidare bestäms mängden proteinmolekyler i fällningen av mängden kväve eller genom att använda kolorimetriska metoder.
Utvärdering av värden
Uppskattning av fällningsvärden i diagnostisk metodik bör ta hänsyn till möjligheten av närvaron i immunserumet av en antikropp som inte har egenskapen fällning, av vilket det följer att fällningen i sig kanske inte är bildas efter att ha reagerat med antigener. Listan över sådana molekyler inkluderar ofullständiga antikroppar och några arter från gruppen gamma-A-globuliner.
Nedfällningsreaktionen under laboratorieförhållanden finner sin tillämpning i olika typer av modifieringar. Till exempel används termofällningsreaktionen för att detektera bakteriella antigener av botulism, mjältbrand, etc., som inte genomgår termisk denaturering. Till skillnad från ringfällning använder denna typ av reaktion filtrat av materialet i fråga i kokt tillstånd.
Analyse av fällningsreaktionen i en komplex blandning tillåter inte att karakterisera egenskaperna hos individuella element i blandningen. I sådana fall tillgriper en person metoden för utfällning i agar och använder också immunelektroferes.
Diffus nederbörd
Inom detta forskningsområde finns konceptet med en diffus utfällningsreaktion (RPD). Den är baserad på förmågan att diffundera i gelen av antikroppar och lösliga antigener. Diffusion är förmågan hos en molekyl av ett visst ämne att penetrera in i en annans molekyler, vilket orsakas av termisk rörelse.
Gel är ett dispergerat system där den flytande fasen är jämnt fördelad i den fasta fasen. Oftast används agargel för en sådan reaktion.
Efter att ha angett parametrarna, införhållanden under vilka molekylerna kan diffundera med avseende på varandra, kommer deras möte att åtföljas av bildandet av ett antigen + antikroppskomplex. En sådan neoplasm kan diffundera, vara i själva gelen, och den kommer att fällas ut i form av en remsa som kan detekteras med blotta ögat. Om antigenet och antikroppen är homologa kommer inget band att bildas.
Att skapa de förhållanden under vilka diffusion kommer att ske i agarlagret innebär att komponenterna hälls ut, men det totala antalet brunnar och deras relativa position bestäms av vilken typ av uppgift som krävs avgöra. RPD ger en person möjligheten att upptäcka och identifiera okända isolerade virus genom att testa med kända antikroppssera.
Application
Nerbörd används i stor utsträckning, inte bara vid diagnos av sjukdomar, utan finner också sin tillämpning vid rättsmedicinska undersökningar. Det är svårt att föreställa sig en analys där det är möjligt att fastställa vilken art av blod, del av ett organ eller vävnad som finns på ett brottsvapen som inte använder utfällningsreaktionen. Under denna process används utfällande sera, som erhålls genom immunisering av olika djur och fåglar. Det är viktigt att serumtiternivån inte är lägre än 1:10000, och den måste också ha tillräcklig specificitet. Från den upptäckta fläcken av blod eller dess skorpa görs ett extrakt för fysisk. lösning, som kommer att exponeras ytterligare förutfällande serum. Enligt denna reaktion är det möjligt att fastställa typerna av vävnads- och organproteiner hos både människor och djur. Att få grumliga extrakt tvingar en att tillgripa nederbörd på agar.
slutsatser
Genom att analysera den lästa informationen kan vi dra slutsatsen att utfällningsreaktioner är extremt viktiga för en person, eftersom de gör det möjligt att diagnostisera olika antigener med hjälp av antikroppar, detta fenomen används också i stor utsträckning vid rättsmedicinsk undersökning och låter dig identifiera typen av blod, vävnad eller organ beroende på ett visst ämne. Det finns flera typer och metoder för nederbörd, som används i enlighet med de nya behoven för det problem som ska lösas.
