Begreppet "mikroskopi" har grekiska rötter. I översättning betyder det att man studerar föremål med hjälp av högprecisionsinstrument. På senare tid har fluorescens och elektronmikroskopi blivit allt populärare.
Upplösning
Under den förstår de som regel det minsta avstånd på vilket tydligt urskiljbara föremål kan placeras. Graden av penetration i den mikroskopiska världen, förmågan att överväga storleken på elementet som studeras beror på utrustningens upplösning. Vid hög förstoring kan objektens gränser smälta samman. Följaktligen finns det vissa gränser bortom vilka approximationen av element är meningslös.
Luminescensmikroskopi: mekanism
När energin som absorberas av ett ämne omvandlas till synlig strålning uppstår en glöd. Det kallas luminescens. Detta fenomen beror på det faktum att vissa ämnen, under påverkan av ljus, börjar avge strålar med en annan (vanligtvis stor) våglängd. Dessutom vissa föremål som under normal belysning har en vissfärg, under påverkan av ultraviolett ljus ändra sin färg.
Specifics
Ett föremål som inte kan ses i ultraviolett ljus kan avge en stark lyster om det behandlas med ett speciellt ämne. I den lyser elementen i olika färger i mörkret. Strålningens styrka är annorlunda, men som regel är den liten. I detta avseende är fluorescensmikroskopi effektiv i ett mörkt rum. När man använder den här typen av studier betraktas föremålet i ljuset som det självt avger. Den kemiska sammansättningen av vävnader, celler kommer att påverka kvaliteten på studien. Fluorescensmikroskopi anses till viss del vara en histokemisk studie.
Klassificering
Fluorescensmikroskopi kan vara primär eller sekundär. I det senare fallet bearbetas föremålet med speciella föreningar som ger en glöd. Primär fluorescerande mikroskopi baseras på grundämnets egen förmåga att avge ljus.
Utrustning
Fluorescensmikroskopi utförs med en mängd olika enheter. Deras huvudelement är illuminatorn. Den är utrustad med en UV-lampa. Dessutom använder enheterna en uppsättning filter. I vissa enheter finns det ganska många olika konfigurationer. Beroende på vilken färg som används för att excitera luminescens - ultraviolett eller blått, placeras ett lämpligt filter mellan ljuskällan och föremålet som studeras. Eftersom glöden från ett mikroskopiskt element är energetiskt svagare än det spännande ljuset, kommer det bara att fångas under ett villkor. Överskottsstrålar från källan måste skäras av med ett gulgrönt filter. Den sitter på enhetens okular. Den mest uttalade effekten av luminescens kommer att vara när filtret helt skär av strålarna som kommer från ljuskällan.
Vad består en installation med synligt ljus av? Den innehåller en stark ljuskälla och ett biologiskt mikroskop. Ett blåviolett filter placeras mellan enhetens spegel och lampan. Det kan vara FS-1, UFS-3 och så vidare. Det gula filtret sätts på okularet på mikroskopet. Med deras hjälp faller blåviolett ljus på föremålet. Det exciterar luminescens. Men detta ljus kan störa att se glöden. Därför skärs den av på vägen till ögat av ett gult filter. Belysning ställs in enligt Koehlermetoden, med ett undantag. Kondensormembranet måste vara helt öppet. Vid undersökning är det viktigt att använda en icke-fluorescerande immersionsolja. För att minska sin egen glöd tillsätts nitrobensen (2-10 droppar / 1 g).
Luminescensmikroskopi: tillämpningar inom mikrobiologi
Fördelarna med den här typen av studier är:
- Färgbildsfunktion.
- Självemitterande element med hög kontrast på en svart bakgrund.
- Detektering och lokalisering av vissa typer av virus och mikrober.
- Förmågan att studera transparent och ogenomskinliglevande organismer.
- Studier av livsprocesser i deras dynamik.
Det ska också sägas att luminescerande mikroskopi bidrar till utvecklingen av de finaste metoderna inom histo- och cytokemi, expressdiagnostik.